研究团队依托清华大学药学院药物技术中心平台，建立基于细胞的免疫功能筛选体系，系统筛选天然免疫激动剂。通过高通量小分子化合物筛选，鉴定出GNE-6468能在多种细胞及人源化小鼠中强烈诱导I型干扰素反应，显著激活天然免疫应答。进一步研究表明，GNE-6468可强烈激活TBK1-STING-IRF3信号通路的磷酸化，且该免疫激活效应依赖于STING和TBK1，而不依赖于cGAS，提示GNE-6468很可能是一种新型STING激动剂。
为深入阐明其作用机制，研究团队利用冷冻电镜技术成功解析了人源STING与GNE-6468复合物的高分辨率结构。结构显示，GNE-6468结合于由STING的TM2、TM3和TM4所形成的跨膜区口袋中，这是一个此前未曾被定义的崭新激动剂结合位点。GNE-6468的结合促使STING的TM3螺旋发生大幅位移，从而诱导STING多聚化与激活。令人意外的是，结构中还观察到位于STING二聚体之间的PI4P分子（经质谱鉴定确认），其发挥类似“分子胶”的作用，与GNE-6468协同激活STING天然免疫信号。基于该独特机制以及GNE-6468在TM2-TM3区域的特殊定位，研究发现STING抑制剂H-151（作用于TM2-TM3 loop）和PI4KB抑制剂（抑制PI4P生成）均能在极低浓度下有效抑制GNE-6468介导的免疫反应。这些结果从分子层面揭示了GNE-6468与PI4P协同激活STING的机制，深化了我们对PI4P免疫调控功能及STING激活机理的认识。
在机制研究基础上，团队进一步对GNE-6468的生物学功能进行了系统表征。研究发现，GNE-6468不仅能激活I型干扰素天然免疫反应，还可诱导非经典自噬，这一特性与其他靶向跨膜区的STING激动剂（如C53）明显不同。同时，研究在多种人源样本中验证了GNE-6468激活免疫反应的能力。为评估其在抗病毒与抗肿瘤免疫治疗中的潜力，团队开展了系统的功能实验，结果显示GNE-6468能以STING依赖的方式发挥强烈的抗病毒与抗肿瘤免疫效应；此外，GNE-6468与PD-1抗体联合用药也表现出显著的协同抗肿瘤效果。
综上所述，该研究阐明GNE-6468是一种靶向全新跨膜区作用位点的新型高效STING激动剂，在抗感染与抗肿瘤治疗中具备潜在临床应用价值。同时，本研究也引发出若干值得深入探索的科学与应用问题：例如，PI4P在cGAMP介导的STING信号及其他关键免疫蛋白（如NLRP3）中的作用机制是什么？STING新发现的跨膜区结合口袋是否可被内源性配体识别？GNE-6468作为一种既能抑制IL-17（通过抑制RORγt）又能激活I型干扰素的小分子，其临床潜力如何？是否在抗疼痛、肠炎、肾炎乃至神经行为学等领域具有应用前景？
清华大学药学院张从刚研究员、刘翔宇研究员和陆军军医大学陆军特色医学中心（大坪医院）陈客宏主任为该论文通讯作者，清华大学博士后韩晶（已出站）、博士生张书豪（已毕业）、侯燕飞和汪依为该论文第一作者。中国医学科学院曹雪涛院士、清华大学尹航教授、天津大学刘培源老师、山西医科大学彭泽旭老师等在该课题实施过程中提供了宝贵的帮助。该研究得到了北京市自然科学基金、国家自然科学基金项目、膜生物学国家重点实验室、清华-北大生命科学联合中心、北京生物结构前沿研究中心、山西医科大学-清华大学前沿医学协同创新中心、清华大学自主科研笃实专项等项目的资助支持。
参考文献
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论文链接：https://www.cell.com/immunity/abstract/S1074-7613(25)00506-0
